真空離心濃縮儀在寡核苷酸合成中的應用

真空離心濃縮儀在寡核苷酸合成（Oligo Synthesis）中扮演著至關重要的角色，是連接“合成"與“純化"的關鍵環節。

寡核苷酸合成（固相亞磷酰胺法）是一個多步循環過程，每一步都涉及化學試劑的添加、反應和洗滌。合成的最終產物通常存在于含高濃度氨水、有機溶劑（如乙腈）或緩沖鹽的溶液中。在進入純化（如HPLC、PAGE、LC-MS）和后續應用（如PCR、基因組裝、藥物遞送研究）之前，必須：

1、去除高濃度氨水

脫保護副產物和溶劑，未除盡的氨水會干擾后續的純化分離和質譜檢測。

2、移除有機溶劑

殘留的乙腈等有機相會影響色譜柱分離效果和質譜離子化效率，導致信號抑制或峰形異常。

3、濃縮樣品

合成后的粗品溶液體積通常較大（數毫升），需濃縮至小體積（微升級）以適應純化儀器的上樣量（如HPLC進樣環體積，通常為50-500 μL）。

傳統方法（如氮氣吹掃、旋轉蒸發）存在處理通量低、易暴沸導致樣品飛濺、或高溫導致長鏈Oligo（>50mer）斷裂降解的缺陷。而真空離心濃縮儀通過結合 離心力、真空和可控加熱，能很好地解決這些問題。

離心濃縮技術的優勢

真空離心濃縮儀在寡核苷酸合成中的核心優勢，在于它能夠以溫和、高效且無交叉污染的方式，完成從粗產物到純化前樣品的關鍵過渡。它利用真空環境顯著降低氨水和有機溶劑的沸點，從而在低溫（通常低于40℃）條件下快速蒸發溶劑，這很好地保護了對熱敏感的寡核苷酸（特別是長鏈和帶有熒光標記的序列）免受降解。同時，其高通量設計能兼容96孔板或離心管，一次運行即可處理數十至數百個樣品，大幅提升了從合成到純化的整體通量。更重要的是，運行過程中離心力確保樣品始終安穩地沉積于管底，有效防止了溶劑暴沸引發的樣品飛濺和交叉污染，為后續獲得高純度的寡核苷酸產品提供了堅實保障。

1、溫和濃縮

在真空環境下，氨水和乙腈/水共沸物的沸點大幅降低，可在室溫至40℃的低溫環境下快速蒸發溶劑，保護對熱敏感的合成產物（特別是帶有熒光標記或磷酸化修飾的Oligo），防止其降解。

2、高通量處理

適配96孔板或384孔板，可在單次運行中濃縮成百上千個樣品，大幅提升合成與純化的通量。

3、防交叉污染

離心力使樣品始終沉積于管底，溶劑蒸汽被冷阱捕獲，有效防止了暴沸導致的樣品交叉污染。

4、兼容性強

可輕松處理含有機溶劑（乙腈、氨水）和水相的混合溶液。

應用流程

在寡核苷酸固相合成與氨水脫保護完成后，首先將含有目標產物、氨水及有機溶劑的粗品溶液轉移至真空離心濃縮儀專用的離心管或96孔板中；隨后，設備在真空環境下通過溫和加熱（通常低于40℃）快速蒸發去除體系中的氨水和乙腈等揮發性溶劑，使樣品濃縮至微升級體積；濃縮后的樣品即可直接用于HPLC或PAGE進行純化分離；最后，將純化后收集的目標產物餾分再次置于濃縮儀中，去除含水流動相，以獲得干燥的寡核苷酸粉末或高濃度溶液，用于后續定量、質檢及下游生物學應用。

1、合成與脫保護

合成完成后，用氨水將寡核苷酸從CPG載體上切割下來，同時脫除堿基保護基。

2、初次濃縮

將粗產物溶液置于真空離心濃縮儀中，去除大部分氨水和有機溶劑。

3、純化

濃縮后的樣品即可用于HPLC或PAGE進行純化。

4、二次濃縮

純化后的收集餾分（含目標Oligo的水溶液）再次進行離心濃縮，去除流動相，得到干燥的寡核苷酸粉末或高濃度溶液，用于后續凍干或直接使用。

富睿捷離心濃縮儀

富睿捷真空離心濃縮設備可同時處理多個樣品，無需擔心交叉污染。系統內程序可設定至多30個，主機配備樣品在線成像系統，可在運行過程中觀察樣品濃縮狀態，并根據不同的樣品對整機的真空度進行調節。設備采用皮拉尼真空計可實時顯示腔體內的真空度，并保證真空度的真實性。根據不同的樣品可對整機轉速進行調節，配備實驗室智能互聯及遠程操控系統及智能云端故障排查系統，手機app可直接操控機器對主機遠程進行腔體預熱，溫度和真空度以及轉速可實時在app顯示。