BioGems支持緩沖液可用于同時研究細胞表面和細胞內抗原。 轉錄因子固定/通透化溶液可與相關抗體配合使用，用于染色檢測轉錄因子（如Foxp3）以及細胞因子、趨化因子和核蛋白的核內染色。

1.通過稀釋10倍的滲透緩沖液（貨號92110-00）制備新鮮工作溶液用蒸餾水稀釋至1倍濃度。每個樣品約需8.5毫升工作溶液。 

2. 通過稀釋生成轉錄因子固定/通透化緩沖液的新鮮工作溶液，將1份濃縮液（貨號92550-00）與3份稀釋劑（貨號92160-00）混合。取1毫升 每份樣本都需要提供工作溶液。

3. 準備感興趣的細胞樣本以進行流式細胞術分析。

4. 如需，可使用合適的活性染料排除死細胞進行分析。 

5. 利用偶聯抗體對目標細胞表面標志物進行染色。

6. 用染色緩沖液洗滌樣本。以300-400×g的轉速離心樣本，棄去上清液。

7.通過使樣品經受脈沖渦流幾秒鐘來分離顆粒。

8.向每個樣品中加入1ml轉錄因子固定/滲透工作溶液脈沖渦流持續時間小于5秒。 

9.在室溫下在黑暗中孵育樣品至少30分鐘。 

10.在室溫下以300-400xg的速度離心樣品，丟棄上清液。 

11.將細胞重新懸浮在2mL 1x滲透工作溶液中。

12.在室溫下以300-400xg的速度離心樣品5分鐘。

13.丟棄上清液，并任選地重復步驟10-12。

14.將顆粒重新懸浮在約100µL的1x滲透緩沖液的剩余體積中。

15.將具有細胞內抗原特異性的結合抗體加入樣品中。

16.在室溫下在黑暗中孵育樣品至少30分鐘。

17.向每個樣品中加入1-2mL 1x滲透工作溶液。

18.在室溫下以300-400xg的速度離心樣品5分鐘。

19.丟棄上清液。

20.將樣品重新懸浮在適當的緩沖液中，用于流式細胞術分析。

提供商	上海牧榮生物科技有限公司	下載次數	0次
資料大小	193.8KB	資料類型	PDF 文件 免費下載該資料
資料圖片	--	瀏覽次數	59次