1. 使用前的準備工作

色譜柱使用前，請先下載并仔細閱讀產品說明書，了解色譜柱的安全范圍，包括可用的流動相、樣品、柱壓、流速、溫度與pH等要求。請注意，一旦超出色譜柱使用范圍，色譜柱將發生不可逆損傷！

2. 色譜柱上機前

在色譜柱連接到儀器之前，請務必將整個儀器管路以及進樣器清洗干凈，并置換為色譜柱可用的流動相。如果設備未經清洗就連接色譜柱并通液，系統中的殘留雜質很有可能流入并造成色譜柱污染，甚至損壞色譜柱！

3. 使用什么流動相？

請嚴格遵守說明書的流動相使用范圍。

4. 流動相用什么級別的試劑配制？

請選用色譜純或更高級別的試劑。若使用分析純等低于色譜純級別的試劑，可能出現鬼峰，甚至污染色譜柱。

5. 色譜柱是否需要活化？

Shodex色譜柱無需特殊活化，色譜柱經流動相充分平衡后即可進樣。

6. 如何將色譜柱接入儀器？

請將泵調至較低流速，并按照柱身標簽方向，將儀器的柱頭螺絲與色譜柱入口端連接并擰緊，等色譜柱出口端有液體流出后，再擰上出口的螺絲。

7. 如何調節流速？

請逐步升高或者降低流速，以免流速驟然改變對色譜柱造成損傷。（e.g. 以SC1011色譜柱為例，如果分析流速是1 mL/min，則建議在0.2 mL/min流速下連接柱子入口，流速以0.2→0.4→0.6…梯度升高至使用流速。降速時也按照同樣梯度逐漸降低流速）。其他型號色譜柱原理相同，請根據具體使用流速設置梯度。

8. 如何調節溫度？

色譜柱的升溫和降溫均在低流速下進行。（e.g. 以SC1011色譜柱為例，在0.2 mL/min低流速下開啟柱溫，待溫度達到指定溫度后，將流速逐步調節至使用流速。分析結束時，千萬不能高溫停泵！應該先逐步將流速降回至0.2 mL/min，關閉柱溫箱加熱模塊，待色譜柱恢復至室溫后，再關閉泵流速）。其他型號色譜柱原理相同，請根據具體使用流速進行設置。

9. 如何計算色譜柱壓力？

1) 壓力計算

儀器面板或工作站軟件顯示的壓力是設備和色譜柱的總壓力。要計算色譜柱的凈壓力，請在相同條件和流速下卸下色譜柱，使用兩通連接管路，并讀取設備的空載壓力。色譜柱凈壓力等于總壓力減去空載壓力。（例如，使用SC1011色譜柱，流動相為H2O，在1 mL/min和80 ℃條件下，設備顯示的壓力為1.5 MPa。卸下色譜柱后，用兩通替換，空載壓力為0.5 MPa，則色譜柱凈壓力為1.5 MPa - 0.5 MPa = 1.0 MPa。其他型號的色譜柱也按此方法計算。）

2) 注意事項

請關注設備的空載壓力。如發現異常，請勿連接色譜柱，以免雜質流入并污染色譜柱。

說明書中提供的色譜柱最大耐壓是去除設備空載壓力后的凈壓力。

根據色譜柱的最大耐壓值，合理設置泵壓上限，以防誤操作導致超壓，損上色譜柱。

10.  如何規范配制柱效測試報告（COA）或實例中的流動相和樣品？

- 例1：樣品濃度為1 %

稱取1 g樣品，用溶劑定容到100 mL

- 例2：流動相：H2O/CH3CN=30/70

分別量取30 mL的純水和70 mL的純乙腈，將二者混合，即為H2O/CH3CN=30/70

- 例3：樣品濃度為5 ppm

1 ppm即一百萬分之一濃度（1×10-6），對于液體，1 ppm=1 mg/L

- 例4：1 L的25 mM CH3COONH4 buffer (pH9.2)

1) 先稱取1927 mg CH3COONH4，用950 mL的水溶解

2) 緩緩地加入氨水(濃度為25 %)，調節至目標pH值9.2

3) 定容至1000 mL

11. 何時需要衍生，如何衍生？

樣品是否需要衍生，取決于其在所用檢測器中的響應信號強弱。若響應信號弱，則需進行衍生。

12. 單次分析時間設置多少合適？

由于不同儀器的管路長度各異，且樣品在不同分析條件下的出峰時間也不盡相同，因此無法統一確定單次分析時間。建議先嘗試進樣一次，以摸索合適的設置時間。

13. 色譜柱的使用壽命是多久？

色譜柱是耗材，使用壽命不定，受設備、試劑、樣品、操作、使用頻率和保存等多種因素影響。請嚴格按照說明書使用。建議搭配保護柱，并使用高純度的試劑或藥品。流動相建議現配現用，樣品在進樣前需充分預處理。流動相和樣品應過膜后再用，以防雜質堵塞或污染柱頭，避免不可逆吸附導致壽命縮短。

14. 常見的損傷色譜柱的原因？

以下操作可能會導致色譜柱產生不可逆的損傷，因此在使用色譜柱之前，請務必仔細閱讀色譜柱說明書和本文中的相關注意事項。具體包括：①流速或壓力超過色譜柱的限制；②使用了色譜柱無法耐受的溶劑；③在色譜柱高溫時直接停泵。

15. 色譜柱使用后、保存前如何沖洗？

正常情況下，先用流動相沖洗至基線平穩，再置換成儲存溶劑（置換方法及儲存溶劑請參閱說明書）。

若出現柱效下降或壓力升高等異常情況，請參考說明書中"色譜柱清洗方法"章節嘗試清洗再生。但需注意，并非所有異常情況均可恢復。

16. 色譜柱如何保存？

色譜柱使用結束后，請將其充分沖洗干凈，并更換為出廠儲存溶劑保存。請勿使用其他試劑長期保存色譜柱，以免造成損壞。如果說明書中沒有特別說明，請勿將色譜柱存放在冰箱中。

一般建議將色譜柱保存在陰涼、溫差變化小的室溫環境中。在存放前，請務必將色譜柱的堵頭擰緊，以防柱內液體揮發導致填料干燥。

17. 保護柱與分析柱如何連接？

如無特殊說明，默認使用帶端部螺絲的額外管線將保護柱與分析柱連接（如下圖所示）。保護柱位于分析柱的上游。請盡量使用短管線，以減少柱外體積擴散對色譜峰形的影響。

18. 如何清洗污染的色譜柱？

在使用色譜柱的過程中，會有樣品、流動相和管路中的雜質被吸附，這些雜質會逐漸積累并可能堵塞柱頭或與填料結合，從而影響色譜柱的性能。當色譜柱受到污染時，可以參考說明書中的“色譜柱的清洗方法"。

在清洗時，可以將柱子反接，這樣可以將堵塞物從柱頭沖出。對于保護柱和多個串聯的柱子，需將它們拆開并單獨清洗。清洗過程中流出的液體應直接導入廢液瓶，不要連接到檢測器上。

19. 是否可以拆開色譜柱清洗污染的部件？

不可以。色譜柱一旦拆開，端部會形成空隙且無法恢復，空隙造成的柱內擴散會降低柱效，嚴重影響色譜柱的正常使用。

20. 如何正確測試色譜柱的柱效？

請參照《柱效測試指南》。

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